技術服務
DNA甲基化檢測—BSP法
DNA甲基化檢測技術服務—BSP法
DNA甲基化是表觀遺傳修飾的主要方式，能在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現。一般說來，DNA的甲基化會抑制基因的表達。DNA的甲基化對維持染色體的結構、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發生發展都起著非常重要的作用。
BSP法原理
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設計BSP引物進行PCR，在擴增過程中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶，**對PCR產物進行測序就可以判斷CpG位點是否發生甲基化稱為BSP-直接測序方法。如將PCR產物克隆至載體后進行測序，可以提高測序成功率，這種方法稱為BSP-克隆測序法。
（一）服務內容
1、基因組DNA的Bisulfite轉化。
2、DNA甲基化檢測——基于BSP（Bisulfite sequencing PCR）法。
3、本公司所用試劑全為進口試劑，實驗全程質量保證。
（二）樣品要求
1、細胞（≥106 個）、組織（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等樣品材料；基因組DNA（體積≥50μl，濃度≥50 ng/μl）；
2、目的基因信息或genebank序列號；
（三）終產品
1、BSP-直接測序方法：Bisulfite處理的基因組DNA；測序峰圖及實驗報告。
2、BSP-克隆測序方法：Bisulfite處理的基因組DNA；陽性克隆質粒；測序峰圖及實驗報告。
（四）服務周期
1、BSP-直接測序方法：1~2周
2、BSP-克隆測序方法：2~4周
（五）關于引物
在基于Bisulfite 轉化的DNA甲基化檢測的方法中，引物是實驗成功的關鍵因素，且因檢測的目的基因片段的不同，合適引物的存在與否有較大的不確定性，請盡量采用經過驗證的引物，如需DNA甲基化檢測引物設計服務，價格另議。